UJI HIV

PEMERIKSAAN 7

I.         JUDUL                                    : PEMERIKSAAN HIV

II.      TANGGAL PRAKTIKUM  :

III.   METODE                                : Strip Tri-Line

IV.   TUJUAN                                 : Untuk Mendeteksi Adanya Antibodi Terhadap Antigen Human Imuno Defisiensi Virus (Hiv) Pada Serum Pasien.

V.      PRINSIP                                  : Deteksi antibodi HIV pada serum/ plasma/  darah , terhadap antigen pada strip. Diamana membrane berbasis immunoassay (strip) untuk mendeteksi antibody HIV-1, HIV-2 dan subtype O pada serum/plasma atau darah. Dan pada membrane (strip) telah dilapisi dengan recombinan Antigen HIV pada garis uji. Dimana pada pemeriksaan diteteskan Buffer solution yang berfungsi sebagi pencuci lalu diteteskan sampel, kemudian diteteskan lagi buffer solution yang berfunsi untuk mencuci perotein atau antibody lain yang tidak berikatan dengan antigen pada strip. Lalu diteteskan Konjugat Protein-A yang berfungsi untuk memberikan warna garis pada control dan test apabila positif.

VI.             DASAR TEORI

Virus imunodifisiensi manusia (bahasa Inggris: human immunodeficiency virus; HIV ) adalah suatu virus yang dapat menyebabkan penyakit AIDS. Virus ini menyerang manusia dan menyerang sistem kekebalan (imunitas) tubuh, sehingga tubuh menjadi lemah dalam melawan infeksi. Dengan kata lain, kehadiran virus ini dalam tubuh akan menyebabkan defisiensi (kekurangan) sistem imun.

Pada tahun 1983, Jean Claude Chermann dan Françoise Barré-Sinoussi dari Perancis berhasil mengisolasi HIV untuk pertama kalinya dari seorang penderita sindrom limfadenopati.  Pada awalnya, virus itu disebut ALV (lymphadenopathy-associated virus). Bersama dengan Luc Montagnier, mereka membuktikan bahwa virus tersebut merupakan penyebab AIDS. Pada awal tahun 1984, Robert Gallo dari Amerika Serikat juga meneliti tentang virus penyebab AIDS yang disebut HTLV-III. Setelah diteliti lebih lanjut, terbukti bahwa ALV dan HTLV-III merupakan virus yang sama dan pada tahun 1986, istilah yang digunakan untuk menyebut virus tersebut adalah HIV, atau lebih spesifik lagi disebut HIV-1.

Tidak lama setelah HIV-1 ditemukan, suatu subtipe baru ditemukan di Portugal dari pasien yang berasal dari Afrika Barat dan kemudian disebut HIV-2. Melalui kloning dan analisis sekuens (susunan genetik), HIV-2 memiliki perbedaan sebesar 55% dari HIV-1 dan secara antigenik berbeda. Perbedaan terbesar lainnya antara kedua strain (galur) virus tersebut terletak pada glikoprotein selubung. Penelitian lanjutan memperkirakan bahwa HIV-2 berasal dari SIV (retrovirus yang menginfeksi primata) karena adanya kemiripan sekuens dan reaksi silang antara antibodi terhadap kedua jenis virus tersebut.

Kedua spesies HIV yang menginfeksi manusia (HIV-1 dan -2) pada mulanya berasal dari Afrika barat dan tengah, berpindah dari primata ke manusia dalam sebuah proses yang dikenal sebagai zoonosis. HIV-1 merupakan hasil evolusi dari simian immunodeficiency virus (SIVcpz) yang ditemukan dalam subspesies simpanse, Pan troglodyte troglodyte. Sedangkan, HIV-2 merupakan spesies virus hasil evolusi strain SIV yang berbeda (SIVsmm), ditemukan pada Sooty mangabey, monyet dunia lama Guinea-Bissau. Sebagian besar infeksi HIV di dunia disebabkan oleh HIV-1 karena spesies virus ini lebih virulen dan lebih mudah menular dibandingkan HIV-2. Sedangkan, HIV-2 kebanyakan masih terkurung di Afrika barat.

Berdasarkan susuanan genetiknya, HIV-1 dibagi menjadi tiga kelompok utama, yaitu M, N, dan O. Kelompok HIV-1 M terdiri dari 16 subtipe yang berbeda. Sementara pada kelompok N dan O belum diketahui secara jelas jumlah subtipe virus yang tergabung di dalamnya. Namun, kedua kelompok tersebut memiliki kekerabatan dengan SIV dari simpanse. HIV-2 memiliki 8 jenis subtipe yang diduga berasal dari Sooty mangabey yang berbeda-beda.

(http://id.wikipedia.org/wiki/HIV)

Jenis-Jenis Pemeriksaan HIV

ELISA

ELISA (Enzym-Linked Immunosorbent Assay), tes ini mendeteksi antibodi yang dibuat tubuh terhadap virus HIV. Antibodi tersebut biasanya diproduksi  mulai minggu ke 2, atau bahkan setelah minggu ke 12 setelah terpapar virus HIV. Kerena alasan inilah maka para ahli menganjurkan pemeriksaan ELISA dilakukan setelah minggu ke 12 sesudah melakukan aktivitas seksual berisiko tinggi atau tertusuk jarum suntik yang terkontaminasi.

Western Blot

Sama halnya dengan ELISA, Western Blot juga mendeteksi antibodi terhadap HIV. Western blot menjadi tes konfirmasi bagi ELISA karena pemeriksaan ini lebih sensitif dan lebih spesifik, sehingga kasus 'yang tidak dapat disimpulkan' sangat kecil. Walaupun demikian, pemeriksaan ini lebih sulit dan butuh keahlian lebih dalam melakukannya.

IFA

IFA atau indirect fluorescent antibody juga meurupakan pemeriksaan konfirmasi ELISA positif. Seperti halnya dua pemeriksaan diatas, IFA juga mendeteksi antibodi terhadap HIV. Salah satu kekurangan dari pemeriksaan ini adalah biayanya sangat mahal.

PCR Test

PCR atau polymerase chain reaction adalah uji yang memeriksa langsung keberadaan virus HIV di dalam darah. Tes ini dapat dilakukan lebih cepat yaitu sekitar seminggu setelah terpapar virus HIV. Tes ini sangat mahal dan memerlukan alat yang canggih. Oleh karena itu, biasanya hanya dilakukan jika uji antibodi diatas tidak memberikan hasil yang pasti. Selain itu, PCR test juga dilakukan secara rutin untuk uji penapisan (screening test) darah atau organ yang akan didonorkan.

(http://gardamd.blogspot.com/2011/10/jenis-jenis-pemeriksaan-hivaids.html)

VII.          Para Analitik.

A.     Persiapan Pasien : Tidak memerlukan persiapan khusus

B.     Persiapan Sampel : Darah lengkap

C.    Alat dan Bahan.

1.      Pipet tetes

2.      Strip HIV

3.      Tabung k3

4.      Darah lengkap

5.      Reagen HIV/ Buffer HIV.

VIII.       Analitik

A.    Pengambilan sampel

1.      Disiapkan alat dan bahan yang akan digunakan.

2.      Dilakukan pengambilan sampel.

3.      Diminta pasien mengulurkan tanganya Untuk diambil sampel darah venanya.

4.      Dibersihkan lengan yang akan diambil sampel darah dengan alkohol, biarkan kering.

5.      Dipasang tourniquet pada lengan, lalu lakukan penusukan  dengan pengambilan sampel darah vena.

6.      Setelah diambil sampel, masukkan sampel kedalam tabung k3 kemudian lakukan pemusingan di sentrifuge selama 15 menit dengan kecepatan 3000 rpm

B.     Pemeriksaan sampel

1.      Siapkan alat dan bahan yang akan digunakan.

2.      Pindahkan tes device dari kantung pembungkus dan gunakan sesegera mungkin. Hasil terbaik akan didapatkan jika pengujiannya dikerjakan dalam satu jam.

3.      Tempatkan tes device pada permukaan yan bersih dan bermutu atau permukaan yang tinggi.

4.      Pegang penetes secara partikel teteskan 25 µl serum / plasma ( 50  ul whole Blood), kemudian tambahkan 40 µl beffer untuk sampel serum (80 µl buffer untuk whole blood).

5.      Hasil dibaca setelah 10 menit. (tidak lebih dari 20 menit).

IX.             INTERPRETASI HASIL

a.                      Positif

                             C    T1   T2                                 

                                           HIV 1

                             C  T1  T2                                        

                                                      HIV 2                               

                                             

                           C   T1   T2

                                           HIV 1 dan 2

b.                   Negatif

                  C   T1  T2               

                                                                                   

c.                      Invalid

C    T1   T2            C    T1   T2

Keterangan hasil penilaian :

a.                   Positif   : Bila terbentuk  2 tanda garis warna merah pada strip yaitu garis control dan pada garis test (T)

b.                  Negatif : Bila terbentuk 1 tanda garis warna merah pada strip yaitu pada garis.

c.                          Invalid : Bila tidak terbentuk garis merah pada strip atau test (T), atau bila ada tanda garis merah pada garis (T), tapi pada garis tidak tampak garis merah

X.                HASIL PENGAMATAN

NAMA PASIEN       :

JENIS KELAMIN     :

UMUR                       :

HASIL                       : Negatif

XI.             PEMBAHASAN

HIV/AIDS termasuk jajaran penyakit yang mempunyai tingkat penularan yang sangat tinggi. Hal ini terjadi karena seringkali seseorang tidak menyadari bahwa dirinya telah terinfeksi HIV, sehingga menjadi sumber penularan bagi orang lain.

Seseorang terkena HIV biasanya diketahui jika telah terjadi Sindrom Defisiensi Imun Dapatan (AIDS) yang ditandai antara lain penurunan berat badan, diare berkepanjangan, Sarkoma Kaposi, dan beberapa gejala lainnya.

Human Immunodeficiency Virus (HIV) ditularkan melalui kontak langsung antara lapisan kulit dalam (membran mukosa) atau aliran darah, dengan cairan tubuh yang mengandung Human Immunodeficiency Virus (HIV), seperti darah, air mani, cairan vagina, cairan preseminal, dan air susu ibu. Penularan dapat terjadi melalui hubungan intim (vaginal, anal, ataupun oral), transfusi darah, jarum suntik yang terkontaminasi, antara ibu dan bayi selama kehamilan, bersalin, atau menyusui, serta bentuk kontak lainnya dengan cairan-cairan tubuh tersebut.

Pada praktikum ini yaitu Untuk Mendeteksi Adanya Antibodi Terhadap Antigen Human Imunodefisiensi Virus (HIV) Pada Serum Pasien. Pertama yang dilakukan yaitu siapkan alat dan bahan yang digunakan. Setelah itu, tempatkan tes device pada permukaan yang steril dan bermutu atau permukaan yang rata. Pegang penetes secara pertikel teteskan 25 µl serum / plasma ( 50  ul whole Blood), kemudian tambahkan 40 µl beffer untuk sampel serum (80 µl buffer untuk whole blood). Baca hasil setelah 10 menit. Namun pada hasil praktikum kami peroleh hasil negatif. Pemeriksaan antibody Human Immunodeficiency Virus (HIV) dalam serum atau plasma merupakan cara yang umum yang lebih efisien untuk menentukan apakah seseorang tak terlindungi dari Human Immunodeficiency Virus (HIV) melindungi darah dan elemen-elemen yang dihasilkan darah untuk Human Immunodeficiency Virus (HIV). Perbedaan dalam sifat-sifat biologis, aktifitas serologis, dan deretan genom, Human Immunodeficiency Virus (HIV) 1 dan 2 positif serta dapat diidentifikasi dengan menggunakan tes serologis dasar Human Immunodeficiency Virus (HIV).

Setelah dilakukan pengujian pada pasien diperoleh hasil yang negatif dimana ditandai dengan hanya terbentuknya 1 garis yaitu hanya pada daerah control setelah penambahan Conjugat Protein-A

XII.          KESIMPULAN

Human Immunodeficiency Virus (HIV) merupakan penyakit yang dapat menyebabkan Acquired immunodeficiency syndrome (AIDS) dengan cara menyerang sel darah putih yang bersama sel CD4 sehingga dapat nerusak system kekebalan tubuh manusia

Pada pemeriksaan pada sampel pasien di peroleh hasil negative.

DAFTAR PUSTAKA

Hardjoeno. 2007. Interpretasi Hasil Tes Laboratorium Diaggnostik. Cet 5. Makassar: Hasanuddin University Press.

http://id.wikipedia.org/wiki/Widal

http://id.wikipedia.org/wiki/Narkoba

http://id.wikipedia.org/wiki/Hepatitis_C

(http://id.wikipedia.org/wiki/HIV)

http://fourseasonnews.blogspot.com/2012/03/pengertian-test-widal-atau-uji-widal.html

http://id.wikipedia.org/wiki/hepatitis_B

http://digilib.unimus.ac.id

http://prodia.co.id/imuno-serologi/tpha

http://www.djamilah-najmuddin.com/sifilis-pada-wanita

http://bomberpipitpipit.wordpress.com/jenis-jenis-narkoba

http://abiluvummi.wordpress.com/2011/01/31/laporan-immunologi-p-narkoba/

(http://caldoknotes.blogspot.com/2011/03/salah-satu-metode-tes-kehamilan.html)

(http://djjars.blogspot.com/2012/04/tes-kehamilan-dengan-deteksi-hormon_07.html#.UOu8JGfdJLU

http://www.news-medical.net/health/What-is-the-Hepatitis-C-Virus-%28Indonesian%29.aspx)

http://gardamd.blogspot.com/2011/10/jenis-jenis-pemeriksaan-hivaids.html

keseluruhan diakses online pada 7 januari 2013

silahkan gunakan semua situs di dapus ini, tapi untuk makalah ini cocokan pada bagian tinjauan pustakanya yaaaaaa............